Podłoże mikrobiologiczne ma umożliwić uzyskanie wiarygodnego wyniku badania: wzrost drobnoustrojów (lub jego brak), ich izolację, różnicowanie albo selekcję. Dlatego najważniejsze są właściwości fizykochemiczne podłoża, bo to one bezpośrednio warunkują przeżycie i namnażanie mikroorganizmów oraz przebieg reakcji wykorzystywanych w diagnostyce.
Do właściwości fizykochemicznych zalicza się m.in.:
- skład jakościowy i ilościowy (źródła węgla i azotu, sole, czynniki wzrostowe, inhibitory),
- pH i zdolność buforowania,
- osmolarność i stężenie soli/cukrów,
- aktywność wody,
- konsystencję (np. zawartość agaru) wpływającą na rozrost kolonii.
Jeżeli te parametry są nieprawidłowe, wynik może być fałszywie ujemny (brak wzrostu), zafałszowany (nadmierny wzrost flory towarzyszącej) albo trudny do interpretacji (zaburzone cechy różnicujące). Z tego powodu w praktyce laboratoryjnej kontroluje się m.in. pH po przygotowaniu, poprawność składu oraz sterylność i wzrostowość na szczepach kontrolnych.
Odpowiedź "Kolor podłoża" nie jest czynnikiem najważniejszym: barwa może wynikać ze wskaźników pH lub składników różnicujących, ale sama w sobie nie przesądza o zdolności podłoża do zapewnienia wzrostu lub selekcji. Może też ulec zmianie wskutek ogrzewania czy autoklawowania bez utraty funkcji (albo odwrotnie: prawidłowy kolor nie gwarantuje poprawnych parametrów).
Odpowiedzi "Koszt podłoża" oraz "Dostępność podłoża na rynku" dotyczą logistyki i ekonomii, a nie merytorycznej przydatności w badaniu. Mogą wpływać na wybór zamiennika, ale wtedy i tak kryterium decydującym musi być równoważność parametrów fizykochemicznych i zgodność z metodyką.
Wskazówka egzaminacyjna: gdy w odpowiedziach pojawiają się czynniki organizacyjne (cena, dostępność, wygląd), a pytanie dotyczy poprawności przygotowania podłoża, zwykle właściwa jest odpowiedź odnosząca się do parametrów wpływających na wzrost drobnoustrojów i przebieg oznaczenia.