KWALIFIKACJA CHM4 - STYCZEŃ 2017

PYTANIE NR 28.
Na rysunku przedstawiono technikę wykonania posiewu bakterii metodą
Ilustracja przedstawia technikę wykonania posiewu bakterii metodą redukcyjną, co jest częścią kwalifikacji zawodowej dla
A.
B.
C.
D.
Wyjaśnienie poprawnej odpowiedzi:
Posiew redukcyjny wykonuje się na powierzchni podłoża stałego na płytce, prowadząc materiał w kolejnych strefach tak, aby stopniowo zmniejszać liczbę komórek i uzyskać pojedyncze kolonie. Posiew wgłębny i płytki lane wiążą się z wprowadzeniem materiału do agaru, a posiew na skos dotyczy podłoża w probówce.

Pełne wyjaśnienie:

Technika posiewu redukcyjnego (często nazywana też posiewem izolacyjnym/strefowym) służy do uzyskania pojedynczych, odizolowanych kolonii na powierzchni podłoża stałego w płytce Petriego. W praktyce wykonuje się ją przez nanoszenie materiału i rozprowadzanie go ezą (lub wymazówką) w kolejnych obszarach płytki tak, aby w każdej następnej strefie na podłożu znalazło się coraz mniej komórek. Efektem końcowym powinny być miejsca, gdzie wyrastają oddzielne kolonie możliwe do przeszczepienia jako czysta kultura.

Odpowiedź "redukcyjną" jest właściwa wtedy, gdy na rysunku widać charakterystyczny schemat rozprowadzania materiału po powierzchni płytki: kolejne pociągnięcia/strefy, w których zagęszczenie posiewu maleje. Kluczową cechą nie jest sama obecność płytki, lecz cel i sposób rozcieńczania mechanicznego przez kolejne przetarcia.

Dlaczego pozostałe odpowiedzi nie pasują do tej techniki:

  • "wgłębną" wybiera się, gdy materiał jest wprowadzany w głąb podłoża (np. przez wkłucie w agar półstały lub wypełnienie/zalanie w sposób powodujący wzrost także wewnątrz). To nie jest metoda strefowego rozrzedzania na powierzchni.
  • "na skos" dotyczy podłoża zestalającego się pod kątem w probówce (skos agarowy). Technika polega na posiewie na powierzchni skosu, a nie na wykonywaniu kolejnych stref redukcji na płytce.
  • "płytek lanych" (metoda pour plate) polega na zmieszaniu zawiesiny drobnoustrojów z płynnym, schłodzonym agarem i wylaniu do płytki. Kolonie mogą wtedy rosnąć zarówno w masie agaru, jak i na powierzchni, a mechanizm nie opiera się na strefowym przecieraniu.

Wskazówka egzaminacyjna: jeśli na rysunku widzisz sekwencję stref i "przerzedzanie" posiewu w kolejnych ruchach po powierzchni – rozpoznawaj posiew redukcyjny. Jeśli widać wkłucie, probówkę ze skosem lub wylewanie agaru – to odpowiednio posiew wgłębny, na skos albo płytki lane.

Dodatkowe pytania

Dodatkowe pytania (FAQ):
Posiew redukcyjny to technika rozprowadzania materiału na powierzchni podłoża stałego w kilku strefach, aby stopniowo zmniejszyć liczbę komórek i uzyskać pojedyncze kolonie. Stosuje się go do izolacji czystej kultury z mieszaniny drobnoustrojów.
Szukaj schematu pracy na płytce, w którym widać kolejne strefy lub serie pociągnięć ezy/wymazówki. Cechą charakterystyczną jest to, że w następnych obszarach posiew staje się coraz rzadszy, aż do uzyskania izolowanych kolonii.
Bo każda kolejna strefa jest w praktyce mechanicznym rozcieńczeniem materiału: przenosisz coraz mniej komórek. Dzięki temu w końcowych strefach pojedyncze komórki mają przestrzeń, by utworzyć osobne kolonie, które można potem przeszczepić.
Posiew wgłębny polega na wprowadzeniu materiału w głąb podłoża (np. wkłucie w agar półstały). Stosuje się go m.in. do oceny ruchliwości, wymagań tlenowych lub wzrostu w warunkach ograniczonego dostępu tlenu, a nie do izolacji kolonii strefami.
Posiew na skos wykonuje się na podłożu zestalonym pod kątem w probówce (skos agarowy). Służy głównie do namnażania i przechowywania kultury oraz obserwacji wzrostu na powierzchni skosu. Nie jest to metoda typowo "izolacyjna" jak posiew redukcyjny.
W metodzie płytek lanych zawiesinę drobnoustrojów miesza się z płynnym, lekko schłodzonym agarem i wylewa do płytki. Kolonie mogą wyrastać w masie agaru i na powierzchni. To inna technika niż rozprowadzanie ezy w strefach na gotowym podłożu.
Najczęściej używa się ezy, ale w praktyce można też zastosować wymazówkę w zależności od procedury i rodzaju materiału. Kluczowe jest zachowanie aseptyki i wykonanie kolejnych stref tak, by w każdej następnej było mniej materiału.
Typowe błędy to: zbyt mocne "nanoszenie" materiału w każdej strefie (brak redukcji), dotykanie tych samych miejsc bez zmiany kierunku, brak jałowości (kontaminacja), oraz zbyt wilgotna powierzchnia agaru, przez co materiał się rozlewa i nie tworzy izolowanych kolonii.
Gdy celem jest uzyskanie czystej kultury do dalszych badań: identyfikacji, oznaczeń biochemicznych, testów wrażliwości na antybiotyki lub kontroli jakości. Posiew redukcyjny jest podstawową metodą izolacji, gdy materiał może zawierać mieszaninę mikroorganizmów.
Ucz się rozpoznawania metod po cechach wizualnych: płytka ze strefami (redukcyjny), wkłucie w agar (wgłębny), probówka ze skosem (na skos), wylewanie/zmieszanie z agarem (płytki lane). Dobrze działa też porównawcza tabela "cel–sprzęt–efekt wzrostu".
info

Statystycznie 51% uczniów zna prawidłową odpowiedź. trudne

Eksperci podkreślają: "Posiew redukcyjny wykonuje się na powierzchni podłoża stałego na płytce, prowadząc materiał w kolejnych strefach tak, aby stopniowo zmniejszać liczbę komórek i uzyskać pojedyncze kolonie."

Materiały:

  • Skrypty z mikrobiologii ogólnej i technik laboratoryjnych (posiewy, podłoża, aseptyka)
  • Instrukcje BHP i procedury pracy jałowej w laboratorium mikrobiologicznym
  • Atlas/zbiór rycin technik posiewu (schematy posiewu redukcyjnego, wgłębnego, płytek lanych)

Aktualizacja pytania: 31.03.2026



Aktualizacja pytania: 31.03.2026
📡 Brak połączenia internetowego