KWALIFIKACJA CHM4 - CZERWIEC 2020

PYTANIE NR 35.
Wzorzec glukozy o stężeniu 0,5 mg/cm3 wykazuje absorbancję 0,150. Jakie jest stężenie glukozy w badanej próbie, jeśli jej absorbancja wynosi 0,450 przy założeniu spełnienia prawa Lamberta-Beera w badanym zakresie stężeń i identycznych warunkach pomiaru?
Ilustracja przedstawia wzór matematyczny używany do obliczania stężenia glukozy w próbce na podstawie jej absorbancji.
A.
B.
C.
D.
Wyjaśnienie poprawnej odpowiedzi:
Prawo Lamberta-Beera w stałych warunkach pomiaru daje zależność A ∝ c. Skoro wzorzec 0,5 mg/cm3 ma absorbancję 0,150, to próbka o absorbancji 0,450 ma absorbancję 3 razy większą (0,450/0,150=3), więc i stężenie jest 3 razy większe: 0,5·3 = 1,5 mg/cm3.

Pełne wyjaśnienie:

W zadaniu zakłada się spełnienie prawa Lamberta-Beera w badanym zakresie oraz identyczne warunki pomiaru (ta sama długość fali, ta sama kuweta i droga optyczna, porównywalna matryca, brak nieliniowości detektora). W takich warunkach absorbancja jest proporcjonalna do stężenia analitu:

A = ε · l · c, gdzie ε i l są stałe w danym pomiarze, a zmienia się tylko c.

Dla wzorca: stężenie wynosi 0,5 mg/cm3 i odpowiada mu absorbancja 0,150. Dla próbki: absorbancja wynosi 0,450. Ponieważ pozostałe czynniki są identyczne, można ułożyć proporcję:

cpróbki / cwzorca = Apróbki / Awzorca

Podstawienie liczb:

cpróbki = 0,5 mg/cm3 · (0,450 / 0,150) = 0,5 mg/cm3 · 3 = 1,5 mg/cm3.

Dlaczego pozostałe propozycje są błędne?

  • "0,075 mg/dm3" ma nie tylko inną jednostkę (dm3 zamiast cm3), ale też wartość liczbową zupełnie niepasującą do tego, że absorbancja próbki jest większa niż wzorca. Taki wynik sugerowałby drastycznie mniejsze stężenie, co przeczy proporcjonalności A do c.
  • "3,0 mg/cm3" odpowiadałoby sześciokrotności wzorca, a tu absorbancja jest tylko trzykrotna. To typowy skutek pomylenia mnożników lub nieuwzględnienia, że 0,450/0,150=3.
  • "7,5 mg/cm3" oznaczałoby piętnastokrotność wzorca. Taki wynik mógłby powstać z błędnego mnożenia 0,5 przez 15 lub z mylenia proporcji.

Wskazówka egzaminacyjna: przy zadaniach z prawem Lamberta-Beera najpierw sprawdź, czy próbka ma większą czy mniejszą absorbancję niż wzorzec. To od razu podpowiada, czy wynik ma być większy czy mniejszy od 0,5 mg/cm3, a potem dopiero policz dokładny współczynnik (tu: 3).

Dodatkowe pytania

Dodatkowe pytania (FAQ):
Prawo Lamberta-Beera opisuje zależność absorbancji od stężenia: A = ε·l·c. Można je stosować, gdy pomiar jest w zakresie liniowości (brak nasycenia detektora), używa się tej samej długości fali i kuwety oraz próbka nie powoduje dodatkowego rozpraszania światła.
Gdy warunki są identyczne, wykorzystaj proporcję: cx = cwz·(Ax/Awz). Najpierw policz stosunek absorbancji, potem pomnóż przez znane stężenie wzorca. To tzw. kalibracja jednopunktowa.
Absorbancja wynika z logarytmu stosunku natężeń światła (np. A = log(I0/I)). Ponieważ jest to stosunek dwóch wielkości o tych samych jednostkach, jednostki się skracają. Dlatego absorbancja nie ma jednostki, w przeciwieństwie do stężenia.
Kluczowe są: ta sama długość fali, ta sama kuweta (droga optyczna), ten sam rozpuszczalnik i podobna matryca, ten sam sposób przygotowania próbek oraz prawidłowe "wyzerowanie" na ślepą próbę. Zmiana któregokolwiek z tych elementów może zmienić zależność A–c.
Nie. Dla zbyt dużych stężeń mogą pojawić się odchylenia od liniowości (np. oddziaływania między cząsteczkami, rozpraszanie, światło błądzące). W praktyce często trzeba rozcieńczać próbkę tak, aby absorbancja mieściła się w zakresie roboczym metody.
Najczęstsze to: odwrócenie proporcji (dzielenie w złą stronę), mylenie absorbancji z transmitancją, brak kontroli "czy wynik ma sens" (np. mniejsze stężenie przy większej absorbancji) oraz błędne mieszanie jednostek (cm3 z dm3) bez świadomej konwersji.
Krzywa wzorcowa jest potrzebna, gdy wymagana jest większa wiarygodność, gdy spodziewasz się nieliniowości, gdy matryca jest złożona lub gdy metoda laboratoryjna tego wymaga. Kilka punktów kalibracyjnych pozwala ocenić liniowość i wychwycić błąd przygotowania pojedynczego wzorca.
Ślepa próba (blank) zawiera wszystko poza analitem i służy do ustawienia zera absorbancji tła (rozpuszczalnik, odczynniki). Dzięki temu mierzysz głównie pochłanianie związane z analitem, a nie z układem pomiarowym lub matrycą.
To warunek, aby ε (współczynnik absorpcji) i l (droga optyczna) były stałe. Wtedy można bezpiecznie przyjąć prostą proporcję A do c. Bez tego trzeba byłoby uwzględnić inne czynniki lub wykonać pełną kalibrację dla danej konfiguracji.
Zastosuj kontrolę sensowności: jeśli absorbancja próbki jest większa niż wzorca, stężenie też musi być większe. Następnie oszacuj rząd wielkości (tu A jest 3 razy większa, więc c też ~3 razy). Dopiero potem policz dokładnie i sprawdź jednostki.
info

To pytanie poprawnie rozwiązuje 65% zdających egzamin. średnie

Według specjalistów z branży: "Prawo Lamberta-Beera w stałych warunkach pomiaru daje zależność A ∝ c."

Źródła:

  • IUPAC Gold Book, hasło: "Beer–Lambert law" (definicja i zależność A ∝ c), https://goldbook.iupac.org/terms/view/B00626 (dostęp: 2026-03-01)
  • Skoog, Holler, Crouch, "Principles of Instrumental Analysis", rozdział o spektrofotometrii UV-Vis i prawie Lamberta-Beera (wydanie zależne od posiadanej wersji; odniesienie ogólne do treści podręcznika)
  • Harris, "Quantitative Chemical Analysis", część dotycząca spektrofotometrii i krzywych kalibracyjnych (odniesienie ogólne do treści podręcznika)

Materiały:

  • Podręczniki z analizy instrumentalnej (rozdziały: spektrofotometria UV-Vis, prawo Lamberta-Beera)
  • Instrukcje laboratoriów szkolnych dotyczące przygotowania roztworów wzorcowych i pomiaru absorbancji
  • Zadania rachunkowe z kalibracji jednopunktowej i wielopunktowej (krzywa wzorcowa)

Aktualizacja pytania: 31.03.2026



Aktualizacja pytania: 31.03.2026
📡 Brak połączenia internetowego